Hoechst 33258 染色液(1mg/ml)

產品簡介：

Hoechst 33258 也稱 bisBenzimide H 33258或HOE 33258，分子式為 C25H24N6O 3HCl，分子量為533.88，CAS Number 23491-45-4。Hoechst 33258 是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低，常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。Hoechst 33258也用于普通的細胞核染色、DNA染色。

Hoechst 33258的zui大激發波長為346nm，zui大發射波長為460nm，Hoechst 33258和雙鏈DNA結合后，zui大激發波長為352nm，zui大發射波長為461nm。NobleRyder Hoechst 33258染色液是濃縮的儲存液，稀釋后使用，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml，用于固定細胞或組織的細胞核染色。

產品組成：

自備材料：

1、熒光顯微鏡

2、蒸餾水

3、微量秱液器

4、PBS 或生理鹽水

操作步驟(僅供參考)：

(一)固定的組織細胞染色

1、根據實驗具體要求，用無菌去離子水秲釋到自己所需濃度，即為Hoechst 33258染色工作液。細胞核染色時，一般推薦工作濃度為1～5μ g/ml。

2、于細胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。如果需要進行免疫熒光染色，則*行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續步驟進行Hoechst 33258染色，如果不需要進行其它染色，則直接進行后續的Hoechst 33258染色。對于貼壁細胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，少加入待染色樣品3倍體積以上的Hoechst 33258染色液，充分混勻。

3、室溫放置 5～8min。

4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。

6、直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

(二)活細胞染色

1、據實驗具體要求，用無菌去離子水稀釋到自己所需濃度，即為Hoechst 33258染色工作液。細胞核染色時，一般推薦工作濃度為1～5μg/ml。

2、取96、24、6孔板培養細胞至合適狀態，按96孔板加入100μl、24孔板加入500μl、6孔板加入1ml的比例，加入適當的Hoechst 33258染色液，染液必須充分覆蓋細胞。

3、在適宜于細胞培養的條件下培養20～30min。

4、輕輕吸除Hoechst 33258染色液。

5、用無菌的 PBS 或生理鹽水清洗 2～3 次，每次 3～5min。

6、進行熒光檢測。

注意事項：

1、NobleRyder Hoechst 33258染色液(1mg/ml)應稀釋至合適的濃度后使用。

2、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測?；罴毎蚪M織染色后宜立即觀察。

3、為減緩熒光淬滅，可以使用抗熒光淬滅封片液。

4、避免反復凍融，否則容易失效。

5、Hoechst33342對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期：12個月有效。