病毒基因組DNA快速提取試劑he
采用特異性結合病毒DNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統,病毒DNA提取試劑he適合于從無細胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養細胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA。病毒基因組DNA快速提取試劑he
病毒基因組DNA快速提取試劑盒
病毒基因組DNA快速提取試劑he
目錄號:40410
試劑盒組成、儲存、穩定性:
試劑盒組成 | 保存 | 50次 (40317-50) |
裂解液DLB | 室溫 | 20ml |
去蛋白液RE | 室溫 | 25ml |
漂洗液WB | 室溫 | 15ml |
第一次使用前按說明加指ding量乙醇 | ||
洗脫緩沖液EB | 室溫 | 15ml |
吸附柱AC | 室溫 | 50個 |
收集管(2ml) | 室溫 | 50個 |
室溫儲存12個月不影響使用效果, 各溶液使用后應及時蓋緊蓋子。
產品介紹:
采用特異性結合病毒DNA的離心吸附柱和du特的緩沖液系統,病毒DNA提取試劑he適合于從無細胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養細胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA。該產品可以滿足絕大多數的病毒DNA的提取要求, 如病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨細胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA后在高離序鹽狀態下選擇性吸附于離心柱內硅基質膜,再通過一系列快速的漂洗-離心的步驟,將鹽、細胞代謝物、蛋白等雜質去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒DNA從硅基質膜上洗脫。純化后的病毒核酸無雜質和PCR抑制劑,可直接適用于PCR、酶切、雜交等分析。
產品特點:
1. 不需要使用有毒的苯fen等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 節省時間,簡捷,單個樣品操作一般可在20分鐘內完成。
3. 多次柱漂洗確保高純度,提取的病毒DNA純度高,質量穩定可靠,可適用于各種操作,包括PCR、酶切、雜交等。
操作步驟:(實驗前請先閱讀注意事項)
提示:第一次使用前請先在15ml漂洗液WB中加入60ml無水乙醇,充分混勻,加入后請及時在方框打鉤標記已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl血清等體液(需回復到室溫,不足可用0.9% NaCl或者PBS補足)轉入上述1.5ml離心管,加入400μl 裂解液DLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。
2. 室溫(15-25℃)放置10分鐘,每隔5分鐘,振蕩混勻一次。
3. 加入450μl無水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻。
如果周圍環境高于25℃,乙醇需要冰上預冷后再加入。
4. 將上述混合物加入一個吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm離心30-60秒,倒掉收集管中的廢液。
如果總體積超過750μl,可分兩次將溶液加入同一個吸附柱AC中。
5. 加500μl去蛋白液RE,12,000rpm離心30秒,棄廢液。
6. 加入500μl漂洗液WB(請先檢查是否已加入無水乙醇!),12,000rpm 離心30秒,棄廢液,加入500μl漂洗液WB,重復一遍。
7. 將吸附柱AC放回空收集管中,13,000rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應。
8. 取出吸附柱AC,放入一個新的離心管中,在吸附膜的中間部位加30-50μl 洗脫緩沖液EB(事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好), 室溫放置1分鐘,12,000rpm 離心1分鐘。如果想得到較多量的DNA,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,12,000rpm離心1分鐘。
洗脫體積越大,洗脫效率越高。如果需要DNA濃度較高,可以適當減少洗脫體積,但是最小體積不應少于20μl,體積過小降低洗脫效率,減少DNA產量。
9. DNA可以存放在2-8℃,如果要較長時間存放,可以放置在-20℃。
病毒基因組DNA快速提取試劑he